Молекулярные мишени гиполипидемических средств

4. Антисмысловые олигонуклеотиды

4.1. Лекарственное средство мипомерсен

Мипомерсен (Mipomerse Sodium, Kynamro) производства компании Genzyme Corporation, Isis Pharmaceuticals (США) одобрен FDA в январе 2013 г. Представляет собой синтетический 20-мерный 2′-О-(2-метокси)этил-модифицированный олигонуклеотид, второе поколение одноцепочечного АСО с конкретным комплементарным связыванием кодирующей области мРНК [нуклеотида 3249-3269] В-100 человека. Этот ингибитор имеет 20 нуклеотидов с кодирующей последовательностью 5′-GCCTCAGTCTGCTTCGCACC-3′ и является химически стабилизированным через фосфотиоат (21).

В нуклеотидную область мипомерсена включены сахара 2′-дезоксирибозы: 2′-O-метил (2’OMe) и 2′-O-метоксиметил (2’MOE) модифицированной рибозы в 3′ и 5′ концевых участках. В этом заключается отличие второго поколения АСО от первого, которое легко разрушается эндонуклеазой и экзонуклеазой и оказывает токсическое воздействие на рост и пролиферацию клеток здоровой ткани. Второе поколение АСО мипомерсена значительно эффективнее по сравнению с первым, поскольку обладает большей активностью, имеет повышенную устойчивость к деградации под действием ферментов нуклеаз, более длительный период полураспада и вызывает меньше побочных реакций (27-30).

Aнтисмысловые олигонуклеотиды предназначены для специфического связывания с мРНК апоВ-100 и предотвращения транслокации мРНК для формирования функционального апо-B100 (22-24). Эндогенные РНКазы ферментов, такие как РНКаза Н или Arganaute 2, распознают двойную мРНК апоB-100 и мипоперсена, разрушая тем самым цепь мРНК, в результате чего функциональный белок апоВ-100 не образуется (25,26). К тому же, разрушаясь под действием ферментов, апоВ-100 не экспрессирует из-за неправильного сплайсинга пре-мРНК для зрелой и функциональной мРНК.

Механизм действия мипомерсена (рис.) (31):

А – мипомерсен (одноцепочечный антисмысловой олигонуклеотид);

В – образуется антисмысловая двойная мРНК. После того как мипомерсен достигает гепатоцита, он проникает через мембрану клетки в ядро (механизм не ясен) и связывается с мРНК апоВ с высокой степенью точности;

С – РНКаза Н (неспецифическая эндонуклеаза, которая гидролизует фосфодиэфирные связи РНК при гибридизации с ДНК) расщепляет мРНК. После гибридизации с мРНК-мишенью мипомерсен-мРНК распознается и расщепляется эндогенной РНКазой Н, ферментом, участвующим в репликации/восстановлении ДНК;

D – результатом расщепления апoB мРНК является снижение синтеза апоВ и уменьшение ЛПНП в сыворотке.

В клинических исследованиях было продемонстрировано, что у пациентов, принимающих мипомерсен, среднее снижение липидных параметров (в %) от исходного уровня оставалось неизменным через 104 нед: ЛПНП – ↓27-28%; апоВ – ↓28-31%; липопротеин – ↓17-21%; ЛПВП – ↑3-10%; триглицериды – ↓3-14%.

Мипомерсен в дозе 200 мг вводится подкожно 1 раз в неделю.

Антисмысловой олигонуклеотид связывается с мРНК ApoB и ингибирует трансляцию и синтез ApoB (1). В результате секреция частиц VLDL из гепатоцитов (2) снижается, что уменьшает образование частиц ЛПНП (3) и, как следствие, снижает уровень LDL-C в крови. Сокращения: ApoB, аполипопротеин B-100; CoA, кофермент A; HMG, 3-гидрокси-3-метилглютарил; LDL-C, LDL-холестерин; LPL, липопротеиновая липаза; MTTP, белок микросомального триглицеридного переноса; VLDL, липопротеин с очень низкой плотностью