СР_6. Особенности метаболизма лейкоцитов

Окрашивание по Романовскому — Гимзе — цитологический метод окрашивания микроорганизмов, клеточных структур и тканей различных видов (в том числе крови) для изучения методом световой микроскопии. Предложена в 1904 году Густавом Гимзой. В авторской версии название красителя — «Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung» (Раствор Гимзы для окраски по Романовскому). Окрашивает ацидофильные образования в различные оттенки красного цвета, базофильные — в цвета от пурпурного до синего.
Состав красителя:

Азур II — 3,772 г

Эозин — 2,165 г

Метиленовый синий — 1,563 г

Метанол (ЧДА) — 750,0 мл

Глицерин (ЧДА) — 256,0 мл

Методика окраски

Мазки, фиксированные в метиловом спирте, окрашивают раствором (1 мл готовой жидкой краски + 2 мл основного буферного раствора + 47 мл дистиллированной воды) в течение 40—120 мин (продолжительность окрашивания подбирают эмпирически). Пользуются фосфатным буфером, но рН буфера зависит от вида мазка: для мазка костного мозга — 5,8—6,0, для мазка крови — 6,4—6,5, для выявления простейших — 6,8, малярийного плазмодия — 7,0—7,2.

Ополаскивают в дистиллированной воде, высушивают и исследуют при иммерсии.

Результаты окрашивания мазков крови

цитоплазма лимфоцитов окрашивается в сине-голубой цвет, их ядра — в цвета от интенсивно пурпурного до фиолетового;
цитоплазма моноцитов окрашивается в мутный голубовато-серый цвет, их ядра — в более светлый пурпурно-красный, нежная азурофильная зернистость;
гранулы базофилов окрашиваются в интенсивный сине-фиолетовый цвет;
гранулы эозинофилов окрашиваются в оранжево-розовый цвет;
гранулы нейтрофилов окрашиваются в цвета от пурпурного до фиолетового;
ядра лейкоцитов фиолетово-красного цвета с хорошо видимой структурой хроматина; хорошо выделяются ядрышки;
грануломеры тромбоцитов окрашиваются в красный, гиаломеры — в голубой;
розовая окраска гемоглобина.