Медицинская биохимия (10 семестр)

Миелин центральной нервной системы содержит некоторые уникальные белки. Белковый состав миелина ЦНС проще, чем у других мембран головного мозга, с основным белком миелина (MBP) и протеолипидным белком (PLP), составляющим 60-80% от общего количества у большинства видов. Многие другие белки и гликопротеины присутствуют в меньшей степени. За исключением MBP, миелиновые белки не являются легко экстрагируемыми и не растворимыми в водных средах. Однако, как и другие мембранные белки, они могут быть солюбилизированы в растворах додецилсульфата натрия и в этом состоянии могут быть легко разделены электрофорезом в полиакриламидных гелях. Этот метод разделяет белки в основном в соответствии с их молекулярной массой (общая нотация Mr для относительной молекулярной массы, а другая - для определения молекулярной массы в килодальтонах, кДа). Наличие связанных углеводов или необычных структурных особенностей несколько искажает связь между электрофоретической миграцией и молекулярным весом, поэтому терминология для определения местоположения белка в таком геле воспринимается как «кажущаяся» молекулярная масса. Белковый состав миелина головного мозга человека и крысы показан на рис. 4-12, В и D соответственно. Количественное преобладание двух белков в миелине ЦНС человека является ясным, то есть MBP и PLP. Эти два белка являются основными составляющими всех миелиновых мембран млекопитающих млекопитающих, и подобные белки присутствуют в миелиновых мембранах многих более низких видов. Общая ориентация этих двух белков в компактном миелине ЦНС изображена на рис. 4-11

Полиакриламидный гель-электрофорез белков миелина в присутствии додецилсульфата натрия (SDS). Белки миелина (А) человека, миелина ЦНС человека (В), миелина (П) крысиного типа (П) и миелина ЦНС крысы (Ц) были солюбилизированы детергентным SDS, электрофорезированным и окрашенным голубым голубым кумасси. Электрофоретическая система отделяет белки в основном в зависимости от их молекулярного размера с наименьшими белками, мигрирующими дальше на дно геля. Аббревиатуры для белков такие же, как в тексте или определенные ниже. Три полосы MBP в дорожках A и B представляют собой изоформы 17,2, 18,5 и 21,5 кДа, генерируемые альтернативным сплайсированием мРНК у людей, а четыре полосы MBP в дорожках C и D представляют собой 14,0, 17,0, 18,5 и 21,5 кДа изоформы, образующиеся у крыс (см. рис. 4-13). 18.5 кДа MBP и 14 кДа MBP также называются P1 и Pr, соответственно, в терминологии для PNS. Модификация 26 кДа, вероятно, является слабой полосой чуть выше PLP, что наиболее очевидно в полосе D. CNP мигрирует как плотный дублет, а нижняя и верхняя полосы иногда называются CNP1 и CNP2 соответственно. Обратите внимание, что местоположение, показанное для MAG (которое слишком слабо окрашивается, чтобы хорошо видно на гелях) находится чуть выше дискретной группы Coomassie-bluestained на дорожке D, которая, вероятно, является субъединицей 96 кДа Na +, K + - ATPase. Т, тубулин. 170 кДа GP, 170 кДа гликопротеина.