Ассистент кафедры Казьмина Ю.С.
Выделение РНК из фиксированных тканей живых объектов (насекомое,
моллюск, икра рыб или земноводных и т.д.). Анализ суммарной РНК методом
гель-электрофореза.
Приготовление амплифицированной двухцепочечной кДНК и оценку качества
препарата с помощью гель-электрофореза. Часть 1.
Синтез первой цепи кДНК, постановка и оптимизация условий ПЦР. Анализ
качества препарата кДНК на агарозном геле. Часть 2
Проведение трех последовательных раунда быстрой амплификации 3’-
концевого фрагмента кДНК флуоресцентного белка из кораллового полипа Clavularia
(3’-RACE). Часть 1
Постановка и оптимизация условий ПЦР, понятие об идентификации
полноразмерных транскриптов. Получение гомогенного продукта ПЦР длиной около
550 п.о., соответствующего 3’-концевой последовательности мРНК.
Часть 2
Стратегия выбора вектора для трансформации E. coli.
Часть 1
Подбор структуры праймеров и амплификация ДНК для последующего
клонирования. Часть 2
Постановка лигирования. Трансформация. Часть 4
Отбор клонов, несущих рекомбинантные плазмиды. Часть
5
Неденатурирующий электрофорез нуклеиновых кислот в агарозном геле.
Часть 6
Клонирование ПЦР-фрагмента в ТА-вектор. Часть 7
Амплификация полной кодирующей последовательности.
Часть 8
Наращивание биомассы, продуцирующей рекомбинантный белок и визуализация
флуоресценции как доказательство функциональной активности этого
белка-процедура. Часть 1
Экспрессия генов в бактериальной гетерологической системе. Экспресс-очистка
рекомбинантного белка из клеточного лизата. Часть 2