Дисциплина Медицинская биохимия. Принципы измерительных технологий в биохимии. Патохимия, диагностика. Биохимия злокачественного роста». Часть 3

Проба Розенталя - Уайта, проба с нагрузкой тетра-бромфенолфталеином (БСФ-проба) предложена в 1925 г. A. Rosenthal, Е. White.

Связи бромсульфалеина (БСФ) с белком, транспортировка этого комплекса и выделение в желчь напоминают биотрансформацию низкомолекулярных веществ (билирубин и др.). БСФ значительно изменяется, проходя печень. Около половины его выделяется из печени в виде соединений с цистеином и глутатионом. Очень небольшое количество краски, не более 10%, непостоянно выделяется через почки. При заболеваниях печени, нарушенном поглощении краски печенью и замедленном поступлении в желчь количество краски, выделяемой через почки, может резко возрастать.

Принцип пробы. Краска выделяется печенью в желчь. При заболевании печени очищение крови от краски замедляется.

Методика. Утром натощак медленно и равномерно вводят внутривенно 5% стерильный раствор бромсульфалеина (дисульфонат натрия тетрабромфенолфталеина - Bromthalein фирмы "Merck", Bromsulfan фирмы "Berlin Chemie") из расчета 5 мг/кг. В качестве растворителя можно использовать стерильную дистиллированную воду. Через 3 мин после окончания вливания из локтевой вены другой руки берут 10 мл крови. Через 45 мин после окончания вливания берут еще 10 мл крови (негемолизированной!)

Для определения бромсульфалеина [Hoffman Н. et al., 1959, и др]. используют микрометод. Здоровая печень экстрагирует из плазмы 10-16 мг краски в минуту. После внутривенного введения краска появляется в дуоденальном содержимом через 15 мин, достигая там максимальной концентрации между 45-й и 76-й минутой. В течение 2 ч в желчь выделяется 75% введенной краски. В крови в норме через 15 мин остается максимум 25%, а через 45 мин - около 5% краски (по Н. Popper и F. Schafner, 6%).

Проба считается отрицательной (т. е. ее результат относится к нормальным), если через 45 мин в крови остается не более 5% краски. Задержка более 6% краски - положительный (патологический) результат пробы.

По данным Н. Andree, Н. Brendt (1984), изредка у здоровых людей наблюдается задержка краски до 8%. Наши наблюдения показывают, что задержка выделения краски в небольших пределах (6-8%) может встречаться и у здоровых и эти небольшие отклонения от нормы должны оцениваться с известной осторожностью.

По другим методикам кровь из вены берут через 30 мин после нагрузки и результаты получают приблизительно те же.

Осложнения при проведении пробы. Тромбофлебиты и флеботромбозы в месте введения краски наблюдаются приблизительно в 0,4-0,6% всех введений. Для предотвращения этих осложнений рекомендуется хранить ампулы с краской в теплом месте (предупреждение кристаллизации), пользоваться тонкими иглами и, наконец, после вливания не сгибать руку в локте. Гемолитические реакции на введение краски встречаются редко.

В сводной статистике, охватывающей 8 работ, общетоксические осложнения наблюдались в 7 случаях, в том числе в одном - тяжелые.

Клиническое значение нарушений выделительной функции печени. При поражении печени процесс выделения БСФ удлиняется на 10-100% пропорционально тяжести поражения печени.

Результаты наших совместных с Ю. Н. Сурниным, И. К. Ряпосовой и С. Н. Гуриным исследований бромсульфалеиновой пробы представлены в табл. 16.

К хроническому холангиогепатиту мы относили хронические воспалительные заболевания печени, развившиеся в связи с задержкой эвакуации желчи по внепеченочным желчным путям.

Бромсульфалеиновая проба применяется главным образом при безжелтушных заболеваниях; поскольку замедленное выделение краски наблюдается при самых небольших поражениях печени, она долго остается патологической после окончания желтушного периода острого вирусного гепатита, положительна при большинстве форм хронических гепатитов, а также при циррозе печени. Важное значение имеют результаты бромсульфалеиновой пробы при жировой дистрофии печени: при прогрессирующей достаточно интенсивной жировой дистрофии проба указывает на патологию, при выраженной, стабильной жировой дистрофии она нормальна.

Патологический результат пробы может зависеть от уменьшения печеночного минутного объема (застойные явления). Как и другие пробы, связанные с выделительной функцией, бромсульфалеиновая проба изменена при механической желтухе. Это связано с нарушением оттока желчи, поэтому задержку выделения до 12% у больных с желтухой не следует рассматривать как проявление недостаточности функции печени. На скорость выведения бромсульфалеина могут влиять также диспротеинемии внепеченочного происхождения. При неосложненных гемолитических желтухах бромсульфалеиновая проба нормальна.

Как уже упоминалось, эта проба относится к наиболее ценным функциональным пробам печени.

Наиболее существенным недостатком метода считалась невозможность применить его для дифференциальной диагностики паренхиматозных и механических желтух, так как при гипербилирубинемии выше 44,2 мкмоль/л (2,5 мг%) проведение пробы технически сложно.

Определение печеночного клиренса при помощи бромсульфалеина. Даже при нормальном состоянии печени небольшая часть краски может выделяться через почки, а при патологии печени почки экскретируют значительное количество краски. В связи с этим Н. Popper и F. Schaffner считают не всегда обоснованным применение термина "клиренс" к бромсульфалеиновому методу определения скорости поглощения краски печенью. Определение печеночного клиренса при помощи бромсульфалеина разработали. R. Goodman, G. Kingsley (1953). Метод приводится в изложении Ю. Минку, Н. Гурбан.

Больных, голодавших 12 ч, взвешивают утром, а затем берут у них 5 мл крови из правой локтевой вены. Тем же способом и при помощи той же иглы им вводят 5% раствор тетрабромсульфонфталеина в количестве 5 мг/кг. Вливание продолжается 30 с. Вслед за этим берут кровь из левой локтевой вены с промежутками в 5, 15, 25, 45 и 75 мин. Взятую кровь центрифугируют и определяют концентрацию краски и клиренс при помощи математических таблиц. В норме средний фракционный клиренс составляет 13,8 ± 1,32%, т. е. за 1 мин очищается 13,8% плазмы. Очищение у половины обследованных заканчивалось через 40-50 мин. Средний фракционный клиренс: для цирроза печени - 3,46 ± 0,37%, для хронического гепатита - 6,0 ± 0,44%.

По аналогичной методике определяют так называемую массу функционирующей паренхимы печени [Anderson Е. et al., 1963, и др.].

Проба Товея - Сондоре дает возможность ориентироваться в скорости поглощения и скорости выделения краски. Вводят внутривенно 0,3 мл 5% раствора краски. Спустя минуту при отсутствии аллергических реакций вводят основное количество краски из расчета 10 мг/кг. Далее из вены извлекают кровь для исследования через 3, 7, 12, 20 и 60 мин.

Первая фаза кривой именуется быстрой и отражает резкое падение концентрации краски в сыворотке крови, вторая фаза, медленная, соответствует отрезку плавного снижения кривой.

Исследуются полупериоды элиминации краски в обеих фазах. Т_1/2 быстрой фазы равен в норме 6,6-6,8 мин. Этот показатель отражает скорость захвата краски печенью, т. е. в общем близок к показателю печеночного клиренса.

Т_1/2 медленной фазы в норме равен 14,5-27,1 мин. Этот показатель отражает скорость конъюгации краски в гепатоците и темпы ее транспорта в желчь.

Методика Товея-Сондоре существенно сложнее пробы Уайта-Розенталя. Пока она широкого распространения не получила. Чаще для раздельного определения поглотительной и выделительной функции печени в клинической практике используются радионуклидные методы (гепатография - см. гл. 11).

В связи со сравнительно нередкими аллергическими реакциями при введении значительных доз бромсульфалеина все шире используется краска, меченная йодом-131. При этом вводится 2-20 мг препарата вместо обычных 400-700 мг.