Дисциплина Медицинская биохимия. Принципы измерительных технологий в биохимии. Патохимия, диагностика. Биохимия злокачественного роста». Часть 3

Историография разработки ПЦР-тестирования cоvid-19

 

Когда 11 января 2020 года ученые из Китая впервые опубликовали информацию о вирусном геноме Covid-19, Малазийский институт медицинских исследований (IMR) успешно выпустил «праймеры и зонды», специфичные для SARS-CoV-2, в тот же день. Лаборатория IMR в Куала-Лумпуре инициировала раннюю готовность, предложив реагенты для обнаружения коронавируса с помощью метода rt-PCR. [67] Тесты ВОЗ (праймеры и зонды), выпущенные спустя несколько дней, были очень похожи на технологию, разработанную в лаборатории IMR, которая использовалась для диагностики первого пациента Covid-19 в Малайзии 24 января 2020 года. [68]

Общественное здравоохранение Англии разработало тест для оральных мазков до 10 января [69] с использованием ОТ-ПЦР в реальном времени на основе определения гена RdRp [70]. Тест обнаружил присутствие любого типа коронавируса, включая специфическую идентификацию SARS-CoV-2. Она была развернута в двенадцати лабораториях по всему Соединенному Королевству 10 февраля. [71] Еще один ранний тест ПЦР был разработан Charité в Берлине, в сотрудничестве с научными сотрудниками в Европе и Гонконге, и опубликован 23 января. Он использовал RT-PCR и из 250 000 таких наборов была сформирована основа для распространения Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ). [72]

Южнокорейская компания Kogenebiotech разработала клинический комплект для обнаружения SARS-CoV-2 на основе ПЦР (PowerChek Coronavirus) 28 января 2020 года. [73] [74] Он обнаруживает ген 'E', общий для всех бета-коронавирусов, и ген RdRp, специфичный для SARS-CoV-2. [75]

В Китае BGI Group была одной из первых компаний, получивших разрешение на экстренное использование от Национального управления медицинской продукции Китая на комплект обнаружения SARS-CoV-2 на основе ПЦР. [76]

В Соединенных Штатах CDC распространил свою диагностическую панель ПЦР в реальном времени SARS-CoV-2 среди лабораторий общественного здравоохранения через Международный Ресурс Реагентов. [77] Один из трех генетических тестов в более старых версиях тестовых наборов вызвал неубедительные результаты из-за некачественных реагентов и недостаточно контролируемого клинического тестирования CDC наборов в Атланте; Это привело к тому, что в течение всего февраля 2020 года в среднем успешно обрабатывалось менее 100 образцов в день. Испытания с использованием двух компонентов не были признаны надежными до 28 февраля 2020 года, и только тогда государственным и частным лабораториям было разрешено начать тестирование. [78] Тест был одобрен FDA в соответствии с EUA. Коммерческие лаборатории США начали тестирование в начале марта 2020 года.

С 5 марта 2020 года LabCorp объявил о доступности тестирования COVID-19 на основе RT-PCR по всей стране. [79] Quest Diagnostics также сделал общенациональное тестирование COVID-19 доступным с 9 марта 2020 года. [80]

В России тест COVID-19 был разработан и изготовлен Государственным научно-исследовательским центром вирусологии и биотехнологии VECTOR. 11 февраля 2020 года тест был зарегистрирован Федеральной службой по надзору в сфере здравоохранения. [81]

Сообщалось, что 12 марта 2020 года в клинике Майо был разработан тест для выявления инфекции COVID-19. [82] 19 марта 2020 года FDA выпустило EUA для Abbott Laboratories [83] для испытания системы Abbott m2000; FDA ранее выдало разрешение, аналогичное Hologic, [84] LabCorp, [85] и Thermo Fisher Scientific. [86] [87] 21 марта 2020 года Cepheid также получил EUA от FDA для теста, который занимает около 45 минут на его системе GeneXpert; Та же система, которая запускает GeneXpert MTB / RIF. [88] [89]

13 апреля министерство здравоохранения Канады одобрило тест Spartan Bioscience. Учреждения могут «тестировать пациентов» с помощью портативного анализатора ДНК «и получать результаты, не отправляя образцы в [центральную] лабораторию». [90] [91]

Изотермическая амплификация

FDA одобрило тест Abbott Laboratories, в котором вместо ПЦР используется технология амплификации изотермических нуклеиновых кислот [11]. Поскольку для этого не требуется серия циклов чередующихся температур, этот метод может дать положительные результаты всего за пять минут и отрицательные результаты за 13 минут. В настоящее время в США насчитывается около 18 000 таких машин, и Abbott планирует увеличить производство до 50 000 тестов в день.

 

Все ли наборы одинаково точны

В марте 2020 года Китай [60] сообщил о проблемах с точностью в своих тестовых наборах.

В Соединенных Штатах тестовые наборы, разработанные CDC, имели «недостатки»; Затем правительство сняло бюрократические барьеры, которые мешали частному тестированию. [61]

Испания приобрела тестовые наборы у китайской фирмы Shenzhen Bioeasy Biotechnology Co Ltd, но обнаружила, что результаты были неточными. Фирма объяснила, что неправильные результаты могут быть результатом неудачного сбора образцов или неправильного использования наборов. Испанское министерство заявило, что заберет наборы, которые дали неправильные результаты, и заменит их другим набором для тестирования, предоставленным Shenzhen Bioeasy. [93]

80% тестовых наборов, которые Чехия приобрела в Китае, дали неверные результаты. [94] [95]

Словакия закупила у Китая 1,2 миллиона тестовых наборов, которые были признаны неточными. Премьер-министр Матович предложил сбросить их в Дунай. [96]

Атеш Кара из Министерства здравоохранения Турции сказал, что тестовые наборы, приобретенные в Турции, имели «высокий уровень ошибок» и не «вводили их в действие» [97] [98].

Великобритания купила 3,5 миллиона тестовых наборов в Китае, но в начале апреля 2020 года объявила, что их нельзя использовать. [99] [100]

 

Контроль за качеством - межлабораторный

ВОЗ рекомендует странам, не имеющим потенциала для тестирования, и национальным лабораториям с ограниченным опытом по использованию COVID-19 направить свои первые пять положительных и первые десять отрицательных образцов COVID-19 в одну из 16 контрольных лабораторий ВОЗ для подтверждающего тестирования [101] [ 102] Из 16 референс-лабораторий 7 находятся в Азии, 5 в Европе, 2 в Африке, 1 в Северной Америке и 1 в Австралии. [103]

Рекомендации ВОЗ

По состоянию на 7 апреля 2020 г. ВОЗ приняла два диагностических теста для закупок в соответствии с процедурой составления перечня экстренных случаев (EUL) для использования во время пандемии COVID-19, чтобы расширить доступ к точным тестам на заболевание гарантированного качества [. 104] Как для диагностики in vitro, так и для тестов используются генотипный коронавирус ПЦР в реальном времени (COVID-19) производства Primerdesign и качественный анализ cobas SARS-CoV-2 для использования в системах cobas® 6800/8800 от Roche Molecular Systems. Утверждение означает, что эти тесты также могут быть предоставлены Организацией Объединенных Наций и другими агентствами по закупкам, поддерживающими тестирование COVID-19.

 

 

Date listed	Product name	Manufacturer
03/4/2020	Cobas SARS-CoV-2 qualitative assay for use on the cobas 6800/8800 Systems	Roche Molecular Systems
07/4/2020	Coronavirus (COVID-19) genesig rtPCR assay	Primerdesign

 

Что разрабатывается?

Тест, в котором используются моноклональные антитела, которые связываются с нуклеокапсидным белком (N-белком) SARS-CoV-2, разрабатывается в Тайване с перспективой на то, что он может дать результаты через 15-20 минут, точно так же, как быстрый тест на грипп. 109] Всемирная организация здравоохранения 8 апреля выразила обеспокоенность тем, что эти тесты должны быть проверены на специфичность и находятся только на стадии исследования. [110] Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США 2 апреля одобрило тест на антитела [111], но некоторые исследователи предупреждают, что такие тесты не должны определять клинические решения, если не известен также процент выживших после COVID-19 людей, которые производят нейтрализующие антитела [112].

 

Подходы к тестированию

Соединенные Штаты проверяли 100 000 человек в день к 27 марта. [28] Для сравнения, несколько европейских стран проводят больше ежедневных тестов на душу населения, чем Соединенные Штаты. [29] [30] Три европейские страны стремятся проводить 100 000 тестов в день - Германия к середине апреля, Великобритания к концу апреля и Франция к концу июня. В Германии имеется большая отрасль медицинской диагностики, в которой имеется более 100 испытательных лабораторий, которые предоставляют технологии и инфраструктуру для быстрого увеличения объема испытаний. Великобритания стремилась диверсифицировать свои биологические компании в диагностику, чтобы расширить возможности тестирования. [31]

В Германии 2 марта Национальная ассоциация врачей обязательного медицинского страхования заявила, что в амбулаторных условиях она способна проводить около 12 000 тестов в день, а 10 700 тестировались на предыдущей неделе. Расходы покрываются медицинской страховкой, когда врач назначает обследование. [32] По словам президента Института Роберта Коха, общая мощность Германии составляет 160 000 тестов в неделю. [33] По состоянию на 19 марта в нескольких крупных городах были проведены тесты на вождение. [34] По состоянию на 26 марта общее количество испытаний, проведенных в Германии, было неизвестно, поскольку сообщается только о положительных результатах. Министр здравоохранения Йенс Спан оценил 200 000 тестов в неделю. [35] Первое лабораторное исследование показало, что по состоянию на конец марта было протестировано в общей сложности не менее 483 295 проб, а 33 491 проб (6,9%) дали положительный результат на SARS-CoV-2. [36]

К началу апреля Соединенное Королевство проводило около 10 000 анализов мазков в день. К концу апреля было установлено целевое значение 100 000 в день, в конечном итоге оно увеличилось до 250 000 в день. [31] Британская NHS объявила, что она опробует схему проверки подозрительных случаев на дому, которая устраняет риск заражения пациента другими, если они приходят в больницу или дезинфицируют машину скорой помощи, если она используется. [37]

В ходе сквозного тестирования на COVID-19 для подозреваемых случаев медицинский работник берет образец, используя соответствующие меры предосторожности. [38] [39] Проходные центры помогли Южной Корее провести одно из самых быстрых и масштабных испытаний в любой стране. [40] Гонконг разработал схему, в которой подозреваемые пациенты могут оставаться дома: «[отделение неотложной помощи передаст пациенту пробирку с образцом», они плюют в нее, отправляют обратно и через некоторое время получают результаты теста [41].

В Израиле исследователи из Техниона и Рамбамской больницы разработали и протестировали метод тестирования образцов от 64 пациентов одновременно, объединяя образцы и проводя дальнейшее тестирование, только если объединенный образец окажется положительным. [42] [43] [44]

В Ухане 5 февраля 2020 года BGI открыла импровизированную лабораторию по обнаружению чрезвычайных ситуаций площадью 2000 кв.м под названием «Хуо-Ян» (кит. 火 眼, «Огненный глаз») [45] [46], которая может обрабатывать более 10 000 образцов в день. [47] [46] [48] Моделирование показало, что при отсутствии лаборатории, строительство которой курировал основатель BGI Ван Цзянем и заняшем 5 дней, случаев болезни в Хубэй были бы на 47% больше, а карантинные затраты удвоились бы. В эксплуатацию. [цитата необходима] За лабораторией Уханя незамедлительно последовали лаборатории Хуо-Яна в Шэньчжэне, Тяньцзине, Пекине и Шанхае, в общей сложности в 12 городах Китая. К 4 марта 2020 года ежедневная пропускная способность составляла 50 000 тестов в день. [49]

Были выпущены мультиплексные проекты с открытым исходным кодом, выпущенные Origami Assays, в которых можно протестировать до 1122 образцов пациентов на COVID19, используя только 93 анализа. [50] Эти сбалансированные конструкции могут работать в небольших лабораториях без необходимости использования роботизированных манипуляторов для жидкости.

 

 

 

Список литературы

27.  Roser, Max; Ritchie, Hannah; Ortiz-Ospina, Esteban (4 March 2020). "Coronavirus Disease (COVID-19) – Statistics and Research". Our World in Data – via ourworldindata.org.

28.  "COVID-19: Tests per day". Our World in Data. Retrieved 15 April 2020.

29.  "Daily COVID-19 tests per thousand people". Our World in Data. Retrieved 15 April 2020.

30.  "Total tests for COVID-19 per 1,000 people". Our World in Data. Retrieved 15 April 2020.

31.  "Coronavirus (COVID-19): Scaling up our testing programmes" (PDF). Department of Health and Social Care. 4 April 2020.

32.  Nina Weber; Katherine Rydlink; Irene Berres (5 March 2020). "Coronavirus und Covid-19: So testet Deutschland". Der Spiegel (in German). Retrieved 23 March 2020.

33.  Oltermann, Philip (22 March 2020). "Germany's low coronavirus mortality rate intrigues experts". The Guardian. ISSN 0261-3077. Retrieved 24 March 2020.

34.  "Covid-19 – Tests auf das Coronavirus: Wann, wo und wie?". Deutschlandfunk (in German). 19 March 2020. Retrieved 24 March 2020.

35.  Charisius, Hanno (26 March 2020). "Covid-19: Wie gut testet Deutschland?" (in German). Retrieved 26 March 2020.

36.  "Täglicher Lagebericht des RKI zur Coronavirus-Krankheit-2019 (COVID-19)" [Germany: Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) Daily Situation Report of the Robert Koch Institute] (PDF). Robert Koch Institute (in German). 15 April 2020.

37.  "NHS pilots home testing for coronavirus". MobiHealthNews. 24 February 2020. Archived from the original on 25 February 2020.

38.  jkiger@postbulletin.com, Jeff Kiger. "Mayo Clinic starts drive-thru testing for COVID-19". PostBulletin.com. Retrieved 13 March 2020.

39.  Hawkins, Andrew J. (11 March 2020). "Some states are offering drive-thru coronavirus testing". The Verge. Retrieved 13 March 2020.

40.  "South Korea's Drive-Through Testing For Coronavirus Is Fast – And Free". npr. 11 March 2020. Retrieved 16 March 2020.

41.  "In Age of COVID-19, Hong Kong Innovates To Test And Quarantine Thousands". NPR.org.

42.  "Pooling method allows dozens of COVID-19 tests to run simultaneously". medicalxpress.com. Retrieved 24 March 2020.

43.  "Israeli team has coronavirus test kit to test dozens of people at once". The Jerusalem Post | JPost.com. Retrieved 24 March 2020.

44.  Staff, Israel21c (19 March 2020). "Israelis introduce method for accelerated COVID-19 testing". Israel21c. Retrieved 24 March 2020.

45.  "Wuhan Test Lab Opens; CDC Ships Diagnostic Kits: Virus Update". Bloomberg. 5 February 2020. Retrieved 7 February 2020.

46.  "China virus crisis deepens as whistleblower doctor dies". AFP.com. 27 February 2012. Retrieved 7 February 2020.

47.  日检测量达万份的"火眼"实验室连夜试运行.

48.  "BGI's Coronavirus Response? Build a Lab in Wuhan". GEN – Genetic Engineering and Biotechnology News. 12 February 2020. Retrieved 27 March 2020.

49.  "COVID-19 Local Laboratory Solution". BGI – Global. Retrieved 27 March 2020.

50.  "Origami Assays". Origami Assays. 2 April 2020. Retrieved 7 April 2020.

51.  "Coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic: increased transmission in the EU/EEA and the UK –seventh update" (PDF). European Centre for Disease Prevention and Control. 25 March 2020. pp. 15–16. Retrieved 29 March 2020. the current shortages of laboratory consumables and reagents affect diagnostic capacity and hamper the epidemic response at the national and local levels. The laboratories have experienced delayed or missing deliveries of swabbing material, plastic consumables, RNA extraction and RT-PCR reagents, and PPE. This is affecting laboratories in all EU/EEA countries.

52.  Baird, Robert P. (24 March 2020). "Why Widespread Coronavirus Testing Isn't Coming Anytime Soon". The New Yorker. Archived from the original on 28 March 2020. Retrieved 29 March 2020. South Dakota, said that her state’s public-health laboratory—the only lab doing COVID-19 testing in the state—had so much trouble securing reagents that it was forced to temporarily stop testing altogether. also noted critical shortages of extraction kits, reagents, and test kits

53.  Ossola, Alexandra (25 March 2020). "Here are the coronavirus testing materials that are in short supply in the US". Quartz. Archived from the original on 26 March 2020. Retrieved 29 March 2020. extract the virus’s genetic material—in this case, RNA—using a set of chemicals that usually come in pre-assembled kits. “The big shortage is extraction kits” There are no easy replacements here: “These reagents that are used in extraction are fairly complex chemicals. They have to be very pure, and they have to be in pure solution”

54.  Fomsgaard, Anders (27 March 2020). "Statens Serum Institut (SSI) solves essential COVID-19 testing deficiency problem". en.ssi.dk. Statens Serum Institut. Archived from the original on 29 March 2020. several countries are in lack of the chemical reagents necessary to test their citizens for the disease.

55.  "Danish researchers behind simple coronavirus test method". cphpost.dk. The Copenhagen Post. 28 March 2020. Archived from the original on 28 March 2020.

56.  Sullivan (now, Helen; Rawlinson, earlier); Kevin; Gayle, Damien; Topping, Alexandra; Mohdin, and Aamna; Willsher, Kim; Wintour, Patrick; Wearden, Graeme; Greenfield, Patrick (31 March 2020). "Global confirmed virus death toll passes 40,000 – as it happened". The Guardian. ISSN 0261-3077. Retrieved 1 April 2020.

57.  "VIDEO: UAE sets up COVID-19 detection lab in just 14 days". Gulf Today. 31 March 2020.

58.  Lee, Timothy B. (2 April 2020). "America's COVID-19 testing has stalled, and that's a big problem". Ars Technica.

59.  "PolitiFact – Biden falsely says Trump administration rejected WHO coronavirus test kits (that were never offered)". @politifact.

60.  Heartbreak in the Streets of Wuhan

61.  "State figures on testing raise questions about efforts to contain outbreak". The BostonGlobe.com. flaws with the testing kits first distributed by the federal government and bureaucratic hurdles that held up testing by private labs at hospitals, universities and testing chains

62.  Davey, Melissa (14 March 2020). "Australian stocks of coronavirus testing kits 'rapidly deteriorating', says chief medical officer" – via www.theguardian.com.

63.  "Experts Credit South Korea's Extensive Testing For Curbing Coronavirus Spread". NPR.org.

64.  "'Test, Test, Test': WHO Chief's Coronavirus Message to World". The New York Times. 16 March 2020. Retrieved 16 March 2020.

65.  Reuters, Source (16 March 2020). "'Test, test, test': WHO calls for more coronavirus testing – video". The Guardian. Retrieved 16 March 2020.

66.  "Coronavirus Testing Backlogs Continue As Laboratories Struggle To Keep Up With Demand". NPR.org.

67.  "Laboratory Readiness for Detecting the 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) infection in Malaysia". Director-General of Health, Malaysia. 9 February 2020.

68.  "Malaysia must ramp up testing". The Star Malaysia. 26 March 2020.

69.  "UK defends coronavirus response after Reuters investigation". Reuters. 9 April 2020. Retrieved 12 April 2020. After developing a test for the new virus by Jan. 10

70.  "COVID-19 virus testing in NHS laboratories" (PDF). NHS England and NHS Improvement. 16 March 2020.

71.  "PHE novel coronavirus diagnostic test rolled out across UK". GOV.UK. Retrieved 30 March 2020; "'Increased likelihood' of China virus reaching UK". BBC News. 23 January 2020. Retrieved 30 March 2020; "PHE tells patients with suspected coronavirus to call GP or NHS 111". The Pharmaceutical Journal. 27 January 2020. Retrieved 30 March 2020.

72.  Sheridan, Cormac (19 February 2020). "Coronavirus and the race to distribute reliable diagnostics". Nature Biotechnology. 38 (4): 382–384. doi:10.1038/d41587-020-00002-2. PMID 32265548.

73.  "KogeneBiotech". Kogene.co.kr. Retrieved 16 March 2020.

74.  Jeong, Sei-im (28 February 2020). "Korea approves 2 more COVID-19 detection kits for urgent use – Korea Biomedical Review". koreabiomed.com (in Korean). Retrieved 12 March 2020.

75.  "ABOUT US | NEWS". kogene.co.kr.

76.  "BGI Sequencer, Coronavirus Molecular Assays Granted Emergency Use Approval in China". GenomeWeb. Retrieved 9 March 2020.

77.  "International Reagent Resource". internationalreagentresource.org.

78.  Transcript for the CDC Telebriefing Update on COVID-19, 28 February 2020

79.  "LabCorp Launches Test for Coronavirus Disease 2019 (COVID-19)". Laboratory Corporation of America Holdings.

80.  "Covid19 : COVID-19". questdiagnostics.com.

81.  "В России зарегистрирована отечественная тест-система для определения коронавируса". Interfax-Russia.ru. 14 February 2020.

82.  Plumbo, Ginger. "Mayo Clinic develops test to detect COVID-19 infection". Mayo Clinic. Retrieved 13 March 2020.

83.  "M2000 Realtime System". Abbott Labs. Retrieved 13 April 2020.

84.  "Hologic's Molecular Test for the Novel Coronavirus, SARS-CoV-2, Receives FDA Emergency Use Authorization". Hologic. 16 March 2020. Retrieved 13 April 2020.

85.  "LabCorp Launches Test for Coronavirus Disease 2019 (COVID-19)". LabCorp. Retrieved 13 April 2020.

86.  "TaqPath COVID-19 Multiplex Diagnostic Solution". ThermoFisher. Retrieved 13 April 2020.

87.  "FDA Approves Abbott Laboratories Coronavirus Test, Company To Ship 150,000 Kits". IBTimes.com. 19 March 2020. Archived from the original on 20 March 2020.

88.  "Sunnyvale company wins FDA approval for first rapid coronavirus test with 45-minute detection time". EastBayTimes.com. 21 March 2020. Archived from the original on 22 March 2020.

89.  "Xpert® Xpress SARS-CoV-2 has received FDA Emergency Use Authorization". www.cepheid.com. Retrieved 13 April 2020.

90.  "Health Canada approves new rapid COVID-testing kits". The Globe and Mail Inc. 13 April 2020.

91.  "The power of DNA testing for everyone". Spartan Bioscience. Retrieved 14 April 2020.

92.  "Abbott Launches Molecular Point-of-Care Test to Detect Novel Coronavirus in as Little as Five Minutes". Abbott. 27 March 2020. Retrieved 2 April 2020.

93.  "Chinese firm to replace exported coronavirus test kits deemed defective by Spain". 27 March 2020 – via www.reuters.com.

94.  Morning, Prague (26 March 2020). "80% of Rapid COVID-19 Tests the Czech Republic Bought From China are Wrong".

95.  VOJTĚCH BLAŽEK (23 March 2020). "Úřad dopředu psal, kdy mohou rychlotesty selhat. I tak je stát nasadil". Zeznam Zprávy (in Czech). Retrieved 7 April 2020. Indeed, the rapid tests that arrived from China a few days ago do not really reliably detect the infection at an early stage

96.  "Europe turned to China for coronavirus testing help. Why some are now regretting it". Fortune.

97.  "Coronavirus test kits purchased from China are unreliable, says Science Committee member". www.duvarenglish.com.

98.  "Coronavirus: Turkey rejects Chinese testing kits over inaccurate results". Middle East Eye.

99.  Reporter, Chris Smyth, Whitehall Editor | Dominic Kennedy, Investigations Editor | Billy Kenber, Investigations. "Britain has millions of coronavirus antibody tests, but they don't work" – via www.thetimes.co.uk.

100.                      "Government's testing chief admits none of 3.5m coronavirus antibody kits work sufficiently". The Independent. 6 April 2020.

101.                      "National laboratories". who.int.

102.                      "PHE novel coronavirus diagnostic test rolled out across UK". GOV.UK. Retrieved 12 April 2020. In addition to processing samples from suspected cases in this country, PHE is now working as a reference laboratory for WHO, testing samples from countries that do not have assured testing capabilities.

103.                      "Specimen referral for COVID-19 – operational details of WHO reference laboratories providing confirmatory testing for COVID-19" (PDF). World Health Organization. Retrieved 29 March 2020.

104.                      "WHO lists two COVID-19 tests for emergency use". World Health Organization. Retrieved 10 April 2020.

105.                      "How an experiment helped one Italian town find 'submerged infections,' cut new COVID-19 cases to zero | National Post". 19 March 2020.

106.                      "COVID-19 outbreak: Petition to close schools in Singapore garners 7,700 signatures to date". msn.com.

107.                      "COVID-19: First results of the voluntary screening in Iceland". Nordic Life Science – the leading Nordic life science news service. 27 March 2020. Retrieved 5 April 2020.

108.                      NormileMar. 17, Dennis; 2020; Am, 8:00 (17 March 2020). "Coronavirus cases have dropped sharply in South Korea. What's the secret to its success?". Science | AAAS. Retrieved 5 April 2020.

109.                      "中央研究院網站". sinica.edu.tw. Sinca. Retrieved 12 March 2020.

110.                      "Advice on the use of point-of-care immunodiagnostic tests for COVID-19". who.int. Retrieved 11 April 2020.

111.                      Romano, Andrew. (7 April 2020). "Fauci once dismissed concerns about 'silent carriers' of coronavirus. Not anymore." Yahoo News Retrieved 17 April 2020.

112.                      McKenna, Stacey. (10 April 2020). "What Immunity to COVID-19 Really Means". Scientific American website Retrieved 17 April 2020.