Методика проведения электрофореза

2. Разделения белков методом SDS-PAG-электрофореза

Электрофорез белков в полиакриламидном геле – это метод разделения смесей белков в полиакриламидном геле в соответствии с их электрофоретической подвижностью. Этот способ фракционирования белков и пептидов широко применяется в современной биохимии, молекулярной биологии, генетике. Существует большое количество модификаций электрофореза белков в полиакриламидном геле, предназначенных для решения различных задач и для разных белков и пептидов. Наиболее распространённой разновидностью является электрофорез белков в полиакриламидом геле в присутствии додецилсульфата натрия по Лэммли (англ. SDS-PAAGE).

На данном этапе важно правильно подобрать условия для проведения электрофореза, а именно концентрацию полиакриламида для концентрирующего и разделяющего гелей. Так, в концентрирующем геле концентрация полиакриламида может колебаться от 2 до 8%, а в разделяющем геле – от 5 до 20%. Выбор плотности геля зависит от молекулярных масс исследуемых белков.